非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測結(jié)果的判定
發(fā)布時間：2019-04-23 閱讀：23582次
非洲豬瘟（ASF）病由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起。 ASFV感染家豬、疣豬和南非野豬。該病通過健康和患病動物之間的直接接觸，或通過受感染的飼料間接接觸，以及通過生物載體（軟蜱）進行傳播。ASF的發(fā)病有特急性、急性、亞急性和慢性的形式。由于豬感染的病毒的毒力不同，死亡率從0％到100％不等。
非洲豬瘟檢測屬于重大疫病檢測，要求儀器具有優(yōu)異的性能，無論是強陽性樣品還是弱陽性樣品，都需要的篩查到。應(yīng)對非洲豬瘟疫情，熒光定量PCR檢測必不可少。
非洲豬瘟檢測熒光定量pcr儀檢測結(jié)果的判定：
1、結(jié)果分析條件設(shè)定
實時熒光PCR檢測閾值設(shè)定原則：閾值線超過陰性對照擴增曲線的高點，且相交于陽性對照擴增曲線進入指數(shù)增長期的拐點，或根據(jù)儀器噪聲情況進行調(diào)整。每個樣品反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)即為Ct值。
2、結(jié)果描述及判定
當陽性對照Ct值≤28.0且出現(xiàn)典型擴增曲線，陰性對照無Ct值無擴增曲線時，實驗成立，實例參考附錄E。當被檢樣品出現(xiàn)典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時，判為非洲豬瘟病毒核酸陽性；被檢樣品無Ct值，判為非洲豬瘟病毒核酸陰性；對于Ct值＞38.0的樣品且出現(xiàn)典型的擴增曲線，應(yīng)重檢，重檢仍出現(xiàn)上述結(jié)果的判為陽性，否則判為陰性。
非洲豬瘟檢測屬于重大疫病檢測，要求儀器具有優(yōu)異的性能，無論是強陽性樣品還是弱陽性樣品，都需要的篩查到。應(yīng)對非洲豬瘟疫情，熒光定量PCR檢測必不可少。
非洲豬瘟檢測熒光定量pcr儀檢測結(jié)果的判定：
1、結(jié)果分析條件設(shè)定
實時熒光PCR檢測閾值設(shè)定原則：閾值線超過陰性對照擴增曲線的高點，且相交于陽性對照擴增曲線進入指數(shù)增長期的拐點，或根據(jù)儀器噪聲情況進行調(diào)整。每個樣品反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)即為Ct值。
2、結(jié)果描述及判定
當陽性對照Ct值≤28.0且出現(xiàn)典型擴增曲線，陰性對照無Ct值無擴增曲線時，實驗成立，實例參考附錄E。當被檢樣品出現(xiàn)典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時，判為非洲豬瘟病毒核酸陽性；被檢樣品無Ct值，判為非洲豬瘟病毒核酸陰性；對于Ct值＞38.0的樣品且出現(xiàn)典型的擴增曲線，應(yīng)重檢，重檢仍出現(xiàn)上述結(jié)果的判為陽性，否則判為陰性。
